明膠蛋白胨是胰酶消化動物明膠所得的蛋白胨,胱氨酸和色氨酸含量低,甘氨酸和脯氨酸含量高,且不含有可發酵的碳水化合物,營養較低。比較適合于糖醇發酵中提供氮源和制備低營養培養基。本品為淡黃色至類白色粉末。
蛋白胨是動物蛋白為基質,經過消化、過濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類白色的干燥粉末。易溶于水,水溶液呈淡黃色。營養豐富可做多種培養基的原材料。在當中它起的主要作用是提供氮源。細菌學蛋白胨含有豐富的蛋白多肽、低肽、氨基酸成分和礦物質。由于用蛋白為原料以及特定的媒介條件,使其含有豐富的色氨酸、脯氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸。這些氨基酸是細菌生長所需的重要成分和生長因子。
一、儲存條件
密封保存
明膠蛋白胨易吸潮結塊,需密封包裝(如鋁箔袋或玻璃瓶)存放,避免與空氣長時間接觸。
避光干燥
儲存環境應陰涼、干燥,溫度建議控制在15-25℃,避免陽光直射或高溫環境(如暖氣旁)。
防污染
遠離化學品、強氧化劑或揮發性物質,防止交叉污染或成分變質。
二、配制方法
溶解溫度控制
明膠蛋白胨含明膠成分,高溫易凝固。配制培養基時,建議先加其他成分(如瓊脂、糖類),待水溫降至40-50℃后再加入明膠蛋白胨,充分攪拌溶解。
若需高溫滅菌(如121℃),需確保配方中其他成分(如瓊脂)能耐受高溫,或調整滅菌程序(如分段滅菌)。
pH調節
溶解后檢查培養基pH,根據目標微生物需求調整(如細菌培養基通常pH 7.0-7.4),避免明膠蛋白胨影響酸堿度。
過濾除菌(可選)
對熱敏感成分或需無菌操作時,可采用0.22μm濾膜過濾除菌,替代高溫滅菌。
三、滅菌處理
高壓蒸汽滅菌
常規滅菌條件為121℃、15-20分鐘。但需注意:
明膠蛋白胨含蛋白質,長時間高溫可能導致營養損失或美拉德反應(產生褐色沉淀)。
若培養基含其他熱敏感成分(如維生素),需優化滅菌時間或采用低溫間歇滅菌法。
滅菌后檢查
觀察培養基是否澄清、無沉淀或異味。若出現渾濁或異常顏色,可能因滅菌過度或成分不兼容,需重新配制。
四、使用注意事項
目標微生物適配性
明膠蛋白胨適用于需氮源豐富的微生物(如細菌、真菌),但某些特殊菌種(如自養型微生物)可能需其他氮源(如硝酸鹽)。
濃度控制
典型用量為0.5%-2%(w/v),過高可能導致滲透壓失衡或代謝產物抑制生長。
避免反復凍融
配制后的培養基若需長期保存,應分裝后冷凍,避免反復解凍導致明膠蛋白胨降解。
與瓊脂的兼容性
若培養基含瓊脂,需確保明膠蛋白胨與瓊脂比例適當(如瓊脂1.5%-2%),避免凝固異常。